Вегетативные формы и цисты патогенных простейших. Циста – что это такое

Цисты под микроскопом

Важно! Функция размножения для некоторых простейших является второстепенной, когда как максимальное распространение в окружающей среде является главной целью. Отдельные группы микробов вообще способны делиться половым способом.

Основные причины инцистирования

Среди многочисленных лабораторных исследований были выявлены основные причины формирования толстой оболочки, обеспечивающей сохранение жизнеспособности микроорганизмов. Учитывая масштабность распространения простейших в окружающей среде, выделяют такие факторы:

  • температурные факторы;
  • избыток или недостаток кислорода в среде обитания;
  • высушивание водоемов;
  • утрата пищевых ресурсов;
  • изменение концентрации кислотности среды.

Методы диагностики

  • выделение каловых масс естественным образом (без вспомогательных медикаментозных способов, без катетеризации);
  • биологические пробы должны быть свежими (от момента сбора до исследования должно пройти не более 5-6 часов);
  • соблюдение диеты за 3-4 дня до сбора кала;
  • исключение абсорбентов и прочих медикаментов за 2 дня до сдачи анализа;
  • перед дефекацией следует помочиться и принять душ;
  • тара для сбора должна быть герметично упакована, простерилизована.

В лабораторных условиях цисты простейших обнаруживаются двумя основными методами выявления цист. Популярным является мазок с раствором Люголя или йода. Для этого свежую порцию испражнений обрабатывают одним из этих растворов, после чего помещают между стеклышками и изучают под увеличительным стеклом. Другим способом является смешение с эфиром, когда образец кала прогоняют в центрифуге. После таких манипуляций цисты выпадают в естественный осадок.

В кале можно обнаружить множество видов одноклеточных. Место их дислокации в основном кишечник. Обнаружить можно цисты простейших следующих классов:

  1. Жгутиковых
  2. Амебных
  3. Кокцидийных
  4. Реснитчатых
  5. Амебиаз

Это заболевание вызывает простейшее – дизентерийная амеба. Это одноклеточное локализуется в толстом кишечнике и выделяется в виде трофизоита или цисты. Большинство амеб не являются патогенными, к ним относятся: кишечная, Бючли, Гартмана. Обнаружить их в кале довольно сложно. Цисту дизентерийной амебы диагностировать проще. Ее присутствие в кале свидетельствует о наличии у человека язвенного или дизентерийного колита. Подозрение на наличие в организме амеб может возникнуть в связи:

  • Со слабостью
  • Прожилками крови в кале

Заболевание при несвоевременности лечения может принять хроническое течение.

В кале обнаруживают следующие формы амеб:

  • Тканевую
  • Просветную
  • Инцистированную
  1. Перитонит
  2. Опухолевое новообразование
  3. Абсцесс кишечника
  4. из заднего прохода

  • Увеличение печени
  • Кровь и слизь в кале
  • Резкое снижение веса

Иногда балантидии обнаруживают в кале в виде цист даже у здоровых людей.

Лямблиоз

  • Потерей веса
  • Вздутием
  • Отсутствием аппетита
  • Пенистым стулом
  • Кожными высыпаниями

Лямблии поражают кишечник механически и блокируют его слизистую, что вредит пищеварению. Пища в кишечнике не может перевариться, и ее остатки начинают гнить. Вследствие этого происходит образование множества бактерий. Приводит это к заболеваниям желчевыводящих путей, желчного пузыря и .

  1. Холецестит
  2. Склерозирующий холангит
  3. Анализ на цисты простейших

Для обнаружения некоторых видов простейших для окрашивания стекла применяются , приготовленные по Грамму. В некоторых случаях метод малоэффективен в отношении некоторых простейших, например, криптоспоридий. Их цисты слабо способны удерживать окраску и их часто путают с дрожжеподобными грибами. В этом случае применяется окраска на кислотность. В этом растворе цисты криптоспродий окрашиваются в розовый или красный цвет, другие микроорганизмы, реагируя на этот раствор, принимают фиолетовый оттенок.

С целью контроля лечения исследование организма на наличие цист простейших проводится в зависимости от заболевания:

  • У больных амебиозом и балантидиазом – на следующие сутки после лечения
  • У больных лямблиозом спустя неделю

Подготовка к анализу

Накануне анализа нужно исключить прием слабительных средств и продуктов, вызывающих разжижение стула. Не следует в течение двух суток до анализа применять , масла и лекарственные препараты для стимуляции перистальтики кишечника. Не принимать в пищу красящие продукты и лекарства.

Цели исследования

Исследование кала на содержание цист простейших проводится с целью:

Лечение балантидиаза

Балантидиаз лечится двумя курсами по пять дней. Назначают Миомицин и Окситетрациклин 4 раза в течение суток. Прогноз при своевременном лечении благоприятный.

Лечение амебиоза

Амебиоз лечат в зависимости от вида заражения, состояния слизистых тканей и органов. Для лечения инвазивного Амебиоза применяют 5 Нитроимидазолы:

  • Секнидозол
  • Метронидозол
  • Трихопол
  • Орнидазол
  • Фасижин

Эти препараты применяются для лечения кишечного амебиоза и для абсцессов любой формы. Больным амебной дизентерией, у которых заболевание протекает в тяжелой форме, помимо перечисленных назначают антибактериальные препараты, чтобы избежать возникновения гнойных абсцессов. При образовании абсцессов проводят его дренирование через кожу (аспирацию). На сегодняшний день амебиоз может быть излечен полностью, если вовремя начать его терапию. А для этого нужна ранняя диагностика и правильно выбранное лечение.

Обнаружение и дифференцирование простейших (отличие патогенных форм от непатогенных) — довольно сложная задача. Большинство одноклеточных организмов в кале обнаруживают в двух формах: вегетативной (стадия трофозоита) — активной, подвижной, жизнедеятельной, легко поддающейся вредным воздействиям (в частности, охлаждению) и потому быстро погибающей после выделения из кишечника, и в виде устойчивых к внешним воздействиям цист (ооцист). В оформленном кале простейшие, как правило, обнаруживают лишь в инцистированном состоянии; для обнаружения вегетативных форм необходимо исследовать кал еще в тёплом состоянии. Это обусловлено тем, что в остывшем кале вегетативные формы простейших быстро гибнут и мертвыми быстро поддаются действию протео-литических ферментов, вследствие чего теряют характерные особенности своей структуры. Кроме того, при остывании уменьшается, а затем исчезает подвижность простейших — важный вспомогательный фактор при их дифференцировании.

В фекалиях можно выявить 20 видов простейших (8 патогенных и условно-патогенных и 12 комменсалов). Простейшие кишечника обитают в тонкой или толстой кишках в стадии трофозоита и/или цисты. Они относятся к одной из 4 групп: амёб, жгутиковых, реснитчатых и кокцидий.

Entamoeba histolytica (дизентерийная амёба) вызывает у человека амёбиаз. Локализуется в толстой кишке, выделяется в форме трофозоита (с жидкими фекалиями) и/или цисты (в оформленном стуле). Вследствие того, что большинство видов амёб (кишечная, Гартмана, Бючли) для человека не патогенны, следует проявлять большую осторожность при оценке результатов исследования фекалий. Только обнаружение трофозоитов-гематофа-гов (тканевая форма Е. histolytica forma magna) может служить достоверным признаком наличия у пациента амёбной дизентерии и/или амёбного язвенного колита. Наличие в протоплазме амёб эритроцитов — очень важный диагностический признак, так как непатогенные формы амёб никогда их не содержат.

Во всех остальных случаях обнаружение Е. histolytica-подобных форм трофозоитов, не содержащих эритроцитов, не является основанием для диагноза амёбиаза как болезни. Аналогичным образом оценивают и результаты выявления только цист Е. histolytica (просветная форма), которые могут быть обнаружены у лиц, выздоравливающих от острого амёбиаза, у страдающих хронической формой амёбиаза и у носителей.

Среди криптоспоридий потенциально патогенными для человека видами являются Cryptosporidium parvum и Cryptosporidium felis (выявлены у ВИЧ-инфицированных). Наиболее типичная локализация инфекции у человека — дистальные отделы тонкой кишки. У пациентов с выраженными им-мунодефицитами может быть инфицирован весь ЖКТ — от ротоглотки до слизистой оболочки прямой кишки.

Диагностика криптоспоридиоза в большинстве случаев основана на обнаружении ооцист криптоспоридий в испражнениях и/или (значительно реже) в биоптате слизистой оболочки тонкой кишки при синдроме водянистой диареи. Используют микроскопию приготовленных препаратов, окрашенных по Граму. В большинстве случаев данный метод окраски не позволяет выявить ооцисты, вследствие их слабой способности удерживать краситель и невозможности отличить их от дрожжеподобных грибов. Поэтому применяют окраску на кислотоустойчивость. При таком методе окраски ооцисты криптоспоридий окрашиваются в красный или розовый цвет и хорошо видны на сине-фиолетовом фоне, в который окрашиваются другие микроорганизмы и содержимое кишечника.

При остром криптоспоридиозе количество ооцист в фекалиях велико, что позволяет легко их обнаружить при микроскопии окрашенных препаратов. Однако при хроническом криптоспоридиозе с лёгким течением, когда количество ооцист в кале мало, для повышения вероятности их обнаружения необходимо использовать методики обогащения. В последние годы для диагностики криптоспоридиоза стали часто использовать серологические методы.

Криптоспоридиоз желчевыводящих путей может проявляться холециститом, значительно реже гепатитом (с повышением концентрации билирубина, активности АСТ, АЛТ, щелочной фосфатазы в крови) и склеро-зирующим холангитом. Для диагностики билиарного криптоспоридиоза исследуют биоптаты печени и жёлчь, где можно обнаружить криптоспоридии в различных стадиях развития.

Для контроля эффективности лечения протозойных поражений кишечника кал исследуют в зависимости от выявленного заболевания: при амёбиазе, балантидиазе — сразу после лечения, при лямблиозе — через 1 нед. После лечения инвазий желчевыводящих путей контроль эффективности можно проводить как при исследовании кала, так и жёлчи.

В норме в кале патогенные простейшие не обнаруживаются.

Обнаружение и дифференцирование простейших (отличие патогенных форм от непато­генных) - довольно сложная задача. Большинство одноклеточных организмов встречается в кале в двух формах: вегетативной - активной, подвижной, жизнедеятельной, легко поддаю­щейся вредным воздействиям (в частности, охлаждению) и потому быстро погибающей после выделения из кишечника, и в виде устойчивых к внешним воздействиям цист.

В офор­мленном кале простейшие, как правило, встречаются лишь в инцистированном состоянии; для обнаружения вегетативных форм необходимо исследовать кал еще в теплом состоянии. Это обусловлено тем, что в остывшем кале вегетативные формы простейших быстро гибнут и мертвыми быстро поддаются действию протеолитических ферментов, вследствие чего те­ряют характерные особенности своей структуры. Кроме того, при остывании уменьшается, а затем исчезает подвижность простейших - важный вспомогательный фактор при их диффе­ренцировании.

В клинической практике наибольшее значение имеет обнаружение в кале следующих простейших, вызывающих заболевания у человека.

Entamoeba histolytica (дизентерийная амеба) вызывает у человека амебиаз. Относится к классу корненожек и встречается в кишечнике в двух формах: тканевой и просветной. Тка­невая форма, называемая также Е. histolytica forma magna, получила свое название вследст­вие того, что проникает в ткани хозяина и, поселяясь там, вызывает изъязвление стенки ки­шечника. Наличие в протоплазме амеб эритроцитов является очень важным диагностичес­ким признаком, так как непатогенные формы амеб никогда их не содержат. Просветная форма, или Е. histolytica forma minuta, обитает в просвете кишечника. В стенку кишечника она не внедряется, поэтому не вызывает ее изъязвления и соответствующей клинической картины. Просветная форма амебы обнаруживается у лиц, выздоравливающих от острого амебиаза, у страдающих хронической формой амебиаза и у носителей. Для острого амебиаза характерно обнаружение тканевой формы амебы. Другие формы амебы (кишечная, Гартма-на, Бючли) являются непатогенными для человека.

  • круглые черви или нематоды (Ришта, Аскариды, Трихинеллы);
  • сосальщики или трематоды (Печеночные сосальщики, Шистосомы, Ланцетовидные двуустки);
  • ленточные черви или цестоды (Фасциолопсис, Свиной и Бычий цепни).

В случае положительного ответа в бланке результатов расшифровывают какие именно патогенные микроорганизмы обнаружены. Самыми опасными являются следующие простейшие (выглядят как одноклеточные организмы, видны только под микроскопом):

Патогенные простейшие попадают в организм при контакте с носителем, а также вместе с зараженными продуктами или водой. В кале здорового человека не обнаруживаются.

Подготовка к анализу на яйца глистов и простейшие

Специальных манипуляций перед обследованием нет. Необходимо за 8–9 часов до сбора анализа прекратить прием пищи и ограничить прием жидкости. Также нужно за 2–3 дня прекратить прием слабительных препаратов и использование клизм.

Собирать кал необходимо в стерильную тару. Для этих целей можно использовать маленькую стеклянную или пластиковую банку (как от детского питания), но изначально ее нужно тщательно вымыть и обдать кипятком. Либо ее можно приобрести в любой аптеке. Аптечные контейнеры очень удобны, они уже стерильны, и к их крышке прикреплена специальная ложечка для удобного сбора материала. К емкости нужно прикрепить листок с фамилией, инициалами и датой взятия материала.

Сбор кала на яйца глистов и простейшие

  • перед сбором фекалий следует помочиться, т. к. попадание мочи может существенно исказить результаты;
  • акт дефекации проводится в сухой, чистый контейнер либо можно простелить в унитаз пакет или пленку.
  • из полученной массы нужно взять примерно 1 столовую ложку;
  • кал нужно брать небольшими порциями из разных мест (снаружи, изнутри);
  • материал собирается в баночку, закрывается крышкой и в кратчайшие сроки доставляется в клинику для исследования.

Сбор кала на яйца глистов и простейшие у ребёнка

Вопрос «Как сдавать анализ кала?» может вызывать некоторые затруднения у родителей, имеющих детей до года, потому что сбор материала имеет свои особенности. Поэтому стоит придерживаться нескольких правил:

  • Малыша необходимо положить на чистую пеленку или клеенку, сделать ему круговой массаж животика для стимуляции испражнений. Можно положить ребёнка на живот. Если дефекации все нет, то можно использовать газоотводную трубку. Использование клизмы или слабительных препаратов не рекомендовано.
  • Собирать кал с одноразовых подгузников не желательно, но если другого выхода нет, то нужно собрать только слой, не касающийся подгузника. И следите, чтобы в кал ребёнка не попала моча.
  • Жидкие каловые массы проще взять с многоразовой клеенки или при помощи мочеприемника.
  • У ребёнка постарше материал взять проще. Для этого можно воспользоваться горшком. Он должен быть вымыт и обработан кипятком. Проводить обработку агрессивными моющими веществами не стоит.

Хранение кала для анализа на яйца глистов

Собранный материал правильно хранить в прохладном месте до 12 часов при температуре от +4 до +8 С в закрытой таре. Но не стоит забывать, что хранение может негативно сказаться на результатах исследований. В идеале его необходимо доставить на изучение не позднее чем через час после сбора.

Хранение кала для анализа на простейшие

Для определения живых микроорганизмов анализ необходимо делать не позднее 15–20 минут после сбора. Цисты живут дольше, поэтому их можно выявить даже спустя несколько часов, но не позднее чем через 24 часа. Хранить собранный материал необходимо в прохладном месте, в плотно закрытой таре.

Соскоб на энтеробиоз

Заражение яйцеглистом называется энтеробиоз. Оно характеризуется расстройствами кишечника и зудом вокруг анального отверстия также возможны аллергические реакции. Одновременно в кишечнике может проживать от десятка до нескольких тысяч особей. Заражение глистами происходит через грязные руки и при контакте с больным энтеробиозом.

Для обнаружения остриц анализа кала недостаточно, достоверность составляет всего 10–15%. Поэтому для диагностики энтеробиоза делается соскоб из анального отверстия. Вероятность обнаружения яиц остриц с помощью этого метода исследования составляет около 50%. В норме у здорового человека результат анализа должен быть отрицательным.

Подготовка к соскобу на энтеробиоз

Никаких специальных подготовок к обследованию не требуется. Соскоб делается утром сразу после сна, и главное условие - не проводить никаких водных процедур в области половых органов и не проводить акт дефекации, это позволит увеличить достоверность результатов. Противопоказанием может служить травмы кожного покрытия в области заднего прохода.

В связи с тем, что материал желательно доставить на исследование в течение двух часов, производить забор лучше в больнице или специализированной лаборатории.

Проведение соскоба на энтеробиоз

Существует три способа сбора анализа:

  • соскоб палочкой в стерильный контейнер;
  • соскоб на стекло шпателем;
  • соскоб на стекло при помощи клейкой ленты.

В первом случае в аптеке необходимо приобрести пластиковую стерильную пробирку с крышкой, специальную длинную палочку с ватой на конце и глицерин либо физраствор. Смачиваете палочку в растворе, раздвигаете ягодицы и делаете несколько мазков вокруг анального отверстия слегка надавливая. Собранный материал помещаете в пробирку.

Во втором случае с помощью стерильного шпателя делаете соскоб со складок кожи и переносите на стекло, которое передается на анализ.

В третьем случае отсоединяете липкую ленту от стекла, стараясь не прикоснуться ни к ней, ни к стеклу. На несколько секунд прикладываете ленту к складкам заднего прохода и прилегающих участков. Затем наклеиваете обратно так, чтобы не образовалось пузырьков.

Если вы делаете соскоб на энтеробиоз дома, то можно использовать скотч и стерильное стеклышко, а на время транспортировки предметное стекло необходимо положить в стерильный контейнер.

Если во время сбора анализа обнаружены взрослые острицы (выглядят как маленькие белые червячки), то их опускают в 75% спиртовой раствор и также отправляют на исследование.

Хранение материала для анализа на энтеробиоз

Собранный материал нужно доставить на исследование в течение двух часов. Это позволит провести качественный анализ и получить верные результаты. В случае задержки, его можно хранить в прохладном месте в ой таре не более 8 часов. В таком случае результативность анализа заметно падает.

Результат анализа кала

Анализ кала на яйца глистов и простейших готовится от 1 до 6 дней. В норме результат должен быть отрицательным. Положительный результат показывает наличие гельминтов и простейших, а также содержит расшифровку их типов.

Соскоб на энтеробиоз готовится в течение одного дня. Результат будет либо положительным, либо отрицательным.

Получая анализы, не следует забывать что ложноположительных результатов не бывает, а отрицательный результат не гарантирует вам отсутствия глистов, и следует провести повторное исследование.